人IL-2复制缺陷型重组腺病毒的构建和鉴定

实用肿瘤学杂志 ›› 2005, Vol. 19 ›› Issue (04): 260-263.

人IL-2复制缺陷型重组腺病毒的构建和鉴定

孙运祥;任丽君;郭玉嵩;田长富

哈尔滨医科大学肿瘤防治研究所,哈尔滨,150040

出版日期:2012-02-21 发布日期:2012-02-21

Construction and identification of human interleukin-2 replication-deficient recombinant adenoviruses

SUN Yunxiang;Ren Lijun;GUO Yusong;TIAN Changfu

Online:2012-02-21 Published:2012-02-21

摘要/Abstract

摘要： 目的构建含hIL-2的复制缺陷型重组腺病毒.方法将hIL-2 DNA片段与载体pDNR-Dual-CMV融合,转化大肠杆菌DH5α.得到重组质粒(pDNR-Dual-hIL-2),经鉴定正确,将pDNR-Dual-hIL-2质粒与pLP-Adeno-x-CMV质粒重组得到重组载体pLP-Adeno-hIL-2,再次转化大肠杆菌DH5α,挑取正确克隆,大量扩增,提取质粒.将此质粒经PacⅠ酶切后与LipofectamineTM 2000转染HEK293细胞,产生含人IL-2的复制缺陷重组腺病毒(AdhIL-2).结果 pLP-Adeno-hIL-2重组载体经PCR、酶切鉴定结果与预期相符,所得重组病毒滴度达到5×107 PFU/ml.结论成功构建了hIL-2的复制缺陷型重组腺病毒.

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