范可尼贫血(FA)是一种罕见的遗传疾病,主要表现为再生障碍性贫血,进行性发育缺陷,易患各种肿瘤。非FA人群的乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌等肿瘤中均存在FA/BRCA通路的损伤缺失。FA/BRCA通路参与细胞染色体双链断裂的同源重组修复。在已经确定的13个FA基因中,包括人们熟知的乳腺癌/卵巢癌易感基因FANCD1/BRCA2。对FA/BRCA通路的研究,有助于我们理解肿瘤的发生发展机制,为寻找有效的药物靶点提供依据。

基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC)是常发生在表皮基底细胞或皮肤附件的一种低度恶性肿瘤,全球发病率有逐年上升趋势,目前临床治疗BCC的重点多放在病灶的处理上,且治疗方法多样。各种治疗方法均有不同的适应症,所以治愈率及疗效也不尽相同,BCC的临床治疗方法主要有药物治疗、放射治疗、物理治疗、手术治疗等,也是整形外科常规治疗疾病。早期发现、早期手术切除依然是临床治疗BCC的首选方法,随着人们对容貌美的追求逐渐提高,临床治疗过程中新方法、新技术不断的被采用。切除性手术也越来越追求手术的美容技巧,力求在达到理想的治疗效果的同时也获得较好的美容效果,因此应根据病人的性别、年龄、部位、肿瘤组织的大小和对美容的需求性,选择合适的临床治疗方法。

目的 分析乳腺癌术后放疗引起放射性肺损伤的临床相关因素,为优化放疗计划提供参考。方法 对96例术后放疗的乳腺癌患者进行回顾性分析,观察手术方式,术后放疗的照射野、照射剂量,辅助化疗的种类、年龄、肺部原有基础疾病与放射性肺损伤发生率的关系。结果 96例乳腺癌患者中发生放射性肺损伤19例,放射性肺损伤的发生与照射野、照射剂量有关(P＜0.05)。结论 术后放疗照射野的设计和放疗剂量的增加是放射性肺损伤发生率增高的主要因素。

目的 探讨RNA干扰技术沉默c-FLIP基因表达联合应用表柔比星对人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的影响。方法 体外化学合成c-FLIP序列特异性双链小干扰RNA(siRNA),转染MCF-7细胞,应用Western blot方法检测c-FLIP蛋白的抑制水平、检测Caspase-8的表达差异;应用流式细胞术检测细胞凋亡的变化及表柔比星与c-FLIP-siRNA联合应用对细胞凋亡的影响。结果 c-FLIP-siRNA能有效地抑制c-FLIP蛋白的表达(P＜0.05),促进细胞的凋亡(P＜0.05)。c-FLIP-siRNA和表柔比星联合应用较单用表柔比星能明显促进MCF-7细胞的凋亡(P＜0.05)。结论 c-FLIP-siRNA能够促进MCF-7细胞的凋亡,并且能够增强表柔比星的抗肿瘤作用。

目的 研究增强型绿色荧光蛋白(pAcGFP)标记的人乳腺癌细胞株MCF7-pAcGFP的生长特性。方法 应用Fugene HD Transfection Reagent转染MCF-7细胞,经G418筛选获得稳定表达pAcGFP的MCF-7细胞系。采用MTT方法检测MCF7-pAcGFP的增殖能力,采用流式细胞仪检测细胞周期,同时采用Western blot方法检测11种蛋白的表达情况。结果 稳定表达pAcGFP的乳腺癌细胞株MCF7-pAcGFP的生长曲线和细胞周期分布与未转染前相似(P＞0.05),Cyclin D1、p27、Fas、FasL、Bcl-2、Bax、Akt、p-Akt(Ser473)、p-Akt(Thr308)、ERK以及p-ERK在两种细胞中表达情况无差别。结论 与亲本细胞相比,MCF7-pAcGFP细胞株的生长特性并没有发生改变,为构建理想的动物模型来研究乳腺癌生长机制奠定了基础。

目的 探讨外科检查、乳腺X线摄影、高频彩超以及三者联合检查对乳腺癌诊断的价值。方法 选择2007年4月-2009年3月齐齐哈尔医学院附属第三医院收治的30岁-70岁女性乳腺癌患者306例。采用外科检查、乳腺X线、高频彩超及三者联合的方法对入选患者进行术前检查,比较四种检查方法诊断率的差异,按照患者年龄、肿瘤大小分层讨论其意义。结果 外科检查、乳腺X线、高频彩超及三者联合的诊断率分别是68.6%、69.9%、80.7%和98.0%;不同年龄组的外科检查、乳腺X线、高频彩超、三者联合的诊断率分别在57.7%-82.4%、61.5%-91.2%、73.2%-94.1%和88.5%-100%之间;不同肿瘤直径外科检查、乳腺X线、高频彩超、三者联合的诊断率分别分布在11.1%-100%、45.8%-77.5%、62.5%-87.5%和77.8%-100%之间。结论 外科检查、乳腺X线、高频彩超三者联合检查能明显提高乳腺癌的诊断率。

目的 探讨乳腺癌保乳手术后的疗效及美容效果,研究影响其局部复发的高危因素。方法 选取我院2000年1月-2008年1月同意接受乳腺癌保乳手术的240例病人为研究对象。均为早期乳腺癌、单发肿物、肿物距乳头2cm以上、无患侧乳腺或胸壁放疗史,以及无活动性结缔组织病史。术后给予化疗、放疗及内分泌治疗,并进行长期随访。结果 全组3年和5年的总存活率分别为97.1%、95.8%,全组3年和5年的无病存活率分别为94.2%、90.8%;单因素及多因素分析均表明,切缘远近为影响复发的高危因素。结论 在规范化治疗过程中,要提高乳腺癌的保乳手术疗效,应多注意肿瘤的大小、切缘浸润的情况,以及术后的综合治疗。

目的 探讨乏氧条件下雷帕霉素(RPM)对乳腺癌细胞的影响及其机制。方法 MTT法检测乏氧条件下RPM对乳腺癌细胞株MCF-7细胞增殖的抑制作用,采用定量RT-PCR和Western blot检测缺氧诱导因子(HIF-1α)、VEGF基因mRNA和蛋白表达。结果 缺氧条件下,RPM对MCF-7细胞生长有抑制作用;HIF-1α蛋白水平随着RPM浓度提高而降低(P＜0.01),而HIF-1α mRNA表达水平无明显变化;VEGF的转录和蛋白表达均随着RPM浓度升高抑制率增加(P＜0.01),呈剂量依赖性。结论 RPM能抑制乳腺癌的肿瘤缺氧反应,从而抑制肿瘤的生长和血管的生成。

目的 探讨应用前哨淋巴结活检(SLNB)技术预测腋窝淋巴结状态的准确性。方法 应用同位素示踪法联合亚甲蓝染料示踪法对68名临床腋窝阴性的早期乳腺癌患者行前哨淋巴结活检术,然后行腋窝淋巴结清扫术(ALND)。对照前哨淋巴结情况与腋窝淋巴结状态的关系,分析SLNB的临床意义。结果 68例患者中检出前哨淋巴结(SLN)66例,检出率为97.06%,共检出SLN 192枚,平均每例2.91枚。66例中,34例SLN阴性患者中,2例为假阴性,假阴性率为5.88%。当SLN阴性时,SLNB预测腋窝淋巴结状态的准确率为94.12%。SLNB检测腋窝淋巴结转移情况的灵敏度为94.12%,特异度为94.12%,SLNB与ALND结果的一致率为77.27%。结论 联合应用染料示踪法和同位素示踪法行SLNB具有较高的检出率,SLNB能较准确的预测腋窝淋巴结的转移情况。

目的 观察全反式维甲酸对人宫颈癌HeLa细胞体外生长的影响;探讨全反式维甲酸对人宫颈癌HeLa细胞影响的机制及其与NDRG1基因的关系;为全反式维甲酸应用于宫颈癌的治疗提供实验依据。方法 用不同浓度全反式维甲酸作用于人宫颈癌HeLa细胞,采用MTT比色法检测细胞生长情况;RT-PCR和Western blot检测全反式维甲酸对宫颈癌HeLa细胞中NDRG1基因和蛋白表达的影响。结果 全反式维甲酸能够抑制宫颈癌HeLa细胞生长,并且这种抑制作用具有浓度和时间的依赖性(P＜0.05);全反式维甲酸能够上调宫颈癌HeLa细胞中NDRG1基因和蛋白的表达。结论 全反式维甲酸能够抑制宫颈癌HeLa细胞生长,这种抑制作用与NDRG1的表达上调相关。

目的 探讨腹腔镜下施行结直肠癌根治术的可行性。方法 回顾性分析我院自2009年1月-2009年12月所实施的97例腹腔镜结直肠癌根治术患者的临床资料。结果 全组均在腹腔镜下完成,行腹腔镜下Dixon术32例,Miles术28例,Hartmann术5例,乙状结肠癌根治术16例,左半结肠癌根治术12例,右半结肠癌根治术4例。2例中转开腹,中转开腹率2.06%。97例结直肠癌患者淋巴结清扫均达第3站。手术时间(193.1±58.3)min。手术出血量(58.3±19.67)mL,术后胃肠道功能恢复时间(2.1±0.7)d,平均53h。术后镇痛泵应用时间(1.3±0.75)d,住院天数(7.1±2.3)d,术后标本切缘均未见癌,淋巴结清扫数(8.6±4.9)枚。术后至今均获随访,肝转移1例,l例于术后2月死于心梗,其余95例无局部、腹盆淋巴结转移复发和切口种植等。结论 腹腔镜下结直肠癌根治术具有微创、安全、切口小、视野清、恢复快等特点,具有可行性。

目的 研究CCR7活化对结肠癌SW620细胞体外增殖、趋化与侵袭活性的影响。方法 MTT法和软琼脂细胞集落培养观察CCR7活化对细胞增殖的影响,Boyden小室法检测CCR7活化对SW620细胞趋化和侵袭活性的影响。结果 和对照组相比CCL21组细胞增殖数量、软琼脂细胞集落数和穿过Boyden小室膜的细胞数均显著增加(P＜0.01)。结论 CCR7活化能够促进结肠癌SW620细胞的体外增殖、趋化与侵袭,其可能参与了结肠癌淋巴结转移的过程。进一步研究CCR7在结肠癌中的作用将有助于阐明结肠癌淋巴结转移的机制。

目的 设计靶向survivin基因的干涉片段,构建真核表达载体pSUPER/survivin并转染宫颈癌HeLa细胞,探讨siRNA抑制survivin表达对联合γ射线宫颈癌HeLa细胞周期的影响。方法 化学合成干涉引物,退火获得survivin基因的干涉片段,连入pSUPER载体并测序。将测序正确的pSUPER/survivin载体转染HeLa细胞株,RT-PCR法和流式细胞术检测HeLa细胞中survivin基因的表达,流式细胞术检测转染联合γ射线照射后各组细胞的细胞周期数据。结果 本实验成功的构建了pSUPER/survivin载体。转染pSUPER/survivin的HeLa细胞其survivin基因表达水平明显低于未转染的HeLa细胞及转染空载体pSUPER的HeLa细胞。γ射线照射后,转染pSUPER/survivin的HeLa细胞发生了S期细胞比例下降,及G₂/M期阻滞。结论 成功的构建了pSUPER/survivin载体,siRNA干涉survivin可以作为提高放射敏感性的潜在分子靶点,通过减少S期细胞比例,促进肿瘤细胞凋亡,通过增加G₂/M期阻滞增加放射线的杀伤。

目的 探讨RET和VEGF-C在甲状腺乳头状癌发生发展中的作用,以及RET和VEGF-C之间相互作用的关系。方法 应用免疫组化二步法检测60例甲状腺乳头状癌和10例正常甲状腺组织中RET蛋白和VEGF-C蛋白的表达情况,分析RET和VEGF-C的蛋白表达率与临床病理学特征之间的关系以及二者表达之间的相关性。结果 RET和VEGF-C在甲状腺乳头状癌与甲状腺正常组织中的阳性表达率之间均具有显著性差异(P＜0.05)。RET和VEGF-C与患者的性别、年龄、肿瘤大小无显著差异(P＞0.05)。RET和VEGF-C与患者的颈部淋巴结转移、临床分期有显著差异(P＜0.05)。RET和VEGF-C之间呈正相关(P＜0.05)。结论 RET表达在甲状腺乳头状癌淋巴结转移方面具有非常重要作用,其有可能通过调节VEGF-C的表达来促进淋巴结的转移。RET和VEGF-C可作为判断甲状腺乳头状癌淋巴结转移的可能指标。

目的 研究RUNX3与OPN在食管鳞癌发生、发展、浸润和转移中的作用以及临床意义。方法 免疫组化检测60例食管鳞癌病人的食管正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及鳞癌组织中RUNX3蛋白和OPN蛋白的表达情况。结果 RUNX3在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管癌组织中分别为78.33%(47/60)、43.48%(10/23)、31.67%(19/60)。RUNX3的表达与食管鳞癌浸润深度和分期均明显相关(P＜0.05)。OPN在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管癌组织中分别为0%(0/60)、34.78%(8/23)及76.67%(46/60),OPN的表达与食管鳞癌浸润深度、淋巴结转移和分期均明显相关(P＜0.05)。RUNX3和OPN在食管鳞癌组织、癌旁不典型增生及正常食管黏膜组织中的表达呈明显的负相关(P＜0.05)。结论 两者联合检测对探讨食管鳞癌的发生、发展、浸润、淋巴结转移及预后判断可能会有更大的意义。

目的 探讨CD34和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在骨肉瘤中表达的关系及临床意义。方法 采用免疫组织化学方法(S-P法)检测48例骨肉瘤组织标本中CD34和MMP-9蛋白的表达。结果 骨肉瘤组织中CD34和MMP-9蛋白的阳性率分别为64.58%和70.83%,显著高于对照组骨软骨瘤组织(P＜0.05)。CD34的表达与骨肉瘤组织分级、肺转移有关(P=0.014,P=0.002)。MMP-9的表达与骨肉瘤组织分级、肺转移有关(P=0.013,P=0.013)。CD34的表达与MMP-9的表达密切相关(r=0.005,P=0.006)。两者的表达与患者的性别、年龄无关。结论 在骨肉瘤中CD34、MMP-9参与肿瘤发生发展过程,并且它们之间具有相关性。

目的 探索优化PCR及测序法检测DNA甲基化的实验条件,检测肺癌hsa-mir-34b(mir-34b)基因启动子DNA甲基化谱。方法 肺癌细胞株A549 DNA进行亚硫酸盐处理后,设计引物扩增mir-34b基因启动子序列,使用普通PCR、巢式PCR和降落(Touchdown)PCR方法以及不同DNA聚合酶进行扩增,甲基化谱检测采用PCR直接测序和克隆后测序两种方法。结果 降落 PCR与巢式PCR方法相结合优于普通PCR及单独的巢式PCR或降落 PCR。HotStart酶优于普通Taq酶及Ex Taq酶。直接PCR测序法的测序图普遍出现套峰难以判读,PCR产物克隆后测序可见清晰的测序峰,甲基化位点可明确判读,并可以结合测序克隆数目提高甲基化检测敏感度。结论 对于重亚硫酸盐处理的DNA甲基化状态检测,推荐使用HotStart酶、降落 PCR与巢式PCR相结合、克隆测序法检测基因甲基化谱,序列图明确且敏感度高。

目的 评价博莱霉素加常规化疗药物及碘油乳剂在肝动脉化疗栓塞中对原发性肝癌肿瘤的祛血管作用及其副反应。方法 对15例大的原发性肝癌经过常规药物和碘化油肝动脉化疗栓塞后疗效不满意的病例,采用常规化疗药物加博莱霉素及碘化油乳剂行肝动脉化疗栓塞。比较栓塞后肿瘤血管支数的变化,栓塞后一周肝功能及血常规恢复情况。结果 应用博莱霉素治疗前血管减少值24±4.75,应用博莱霉素治疗后血管减少值43±11.89,二者比较统计学显著差异(P=0.001)。应用博莱霉素治疗前后WBC值、肝功能ALT值、BILT值及ALB值比较均无明显统计学差异(P＞0.05)。应用博莱霉素治疗前后发热反应发生率均为73.3%,呕吐反应发生率为53.3%。应用博莱霉素治疗前疼痛发生率为80%,应用博莱霉素治疗后疼痛发生率为60%,统计学无显著性差异。结论 博莱霉素加常规化疗药物及碘油乳剂对原发性肝癌有明显祛血管作用,副反应很小。

目的 探讨莪术对肿瘤的抑制作用,为临床应用其抗肿瘤治疗提供科学依据。方法 应用整体动物实验方法及体外MTT法,检测不同浓度的莪术提取液和抗肿瘤药物环磷酰胺、5-Fu作用下,小鼠移植肿瘤肉瘤S180、肝癌H22、艾氏腹水癌的肿瘤抑制率、生命延长期及肠癌细胞株SW480的细胞抑制率。结果 各试验浓度的莪术提取液对肉瘤S180有不同程度的抑制作用,抑瘤率随提取液剂量的增加而增高,同时毒性也相应增加。莪术提取液对肝癌H22也有较强的抑制作用,延长了艾氏腹水癌小鼠的生存时间,且毒性反应出现较晚,中毒程度也轻于肉瘤S180组。莪术提取液在较高浓度(10.0 PPC)时,明显抑制肠癌细胞SW480的增殖活性,5.0 PPC以下浓度的抑瘤作用不及化疗药物。体内外实验中均产生不同程度的毒性。结论 莪术提取液可有效抑制肿瘤生长,在临床应用时注意观察毒性反应。

目的 探讨食管癌根治术中,食管胃颈部吻合中管状吻合器的应用方法。方法 回顾分析51例食管癌患者做食管癌根治术并用管状吻合器进行食管胃颈部吻合的结果。结果 术后吻合口瘘3例,无吻合口狭窄,无手术死亡和住院死亡。结论 管状吻合器颈部吻合术吻合完整快捷,明显地减少了手术操作时间和吻合口并发症的发生。

目的 探讨中心静脉导管胸腔灌注万特普安治疗恶性胸腔积液的护理要点。方法 对21例胸腔灌注万特普安治疗恶性胸腔积液期间,给予相应的心理护理,注药后护理及饮食指导。结果 胸腔注药后,经过全面、精心、细致的护理,病人完成治疗计划,无并发症出现,达到护理目的。结论 胸腔注药后加强护理、及时观察、处理毒副反应,才能保证治疗的顺利进行,提高治疗效果,改善患者生存质量。