目的构建含微小染色体维持蛋白MBP-hmcm6的原核表达重组质粒,并进行可溶性表达与初步纯化.方法以常规克隆方法将目的片段连接至pMAL-p2x载体,获得的阳性克隆转化大肠杆菌Rosetta(DE3)进行表达.结果经Western blot鉴定,获得了分子量大小为139 KD的MBP-hMCM6p蛋白.结论成功构建了pMAL-p2x-hmcm6重组质粒和工程菌,实现了重组蛋白可溶性表达,有助于进一步研究MCM蛋白的结构与功能.

目的评价E-cadherin抗体辨认体腔积液内癌细胞的价值.方法采用石蜡细胞块技术对62例恶性体腔积液标本和22例间皮增生的体腔积液标本进行免疫细胞化学检测E-cadherin、BerEP4、CEA、Calretinin和Desmin,并计算各抗体辨认癌细胞或间皮细胞的敏感性和特异性.62例恶性体腔积液标本中癌性积液53例(包括肺非小细胞癌29例,肺小细胞癌2例,乳腺癌5例,胃癌4例,大肠癌3例,肝癌1例,食道癌3例,胰腺癌1例,卵巢癌4例,子宫颈癌1例),非癌性积液4例(包括淋巴瘤2例,骨髓瘤1例和恶黑1例),不明组织来源5例.结果62例恶性体腔积液标本E-cadherin的阳性率为85.5%(53/62).去除不明组织来源和非癌性积液病例后,53例癌性积液的E-cadherin阳性率为88.7%(47/53),其中乳腺、食道、大肠和卵巢等部位来源的癌性积液的阳性率均为100%.而间皮细胞E-cadherin反应均为阴性.E-cadherin、BerEP4和CEA检测癌细胞的敏感性分别为88.7%、79.2%和67.9%,E-cadherin、BerEP4和CEA检测癌细胞的特异性分别为96.2%、100%和92.3%.Calretinin和Desmin检测间皮细胞的敏感性100%和91%,特异性分别为94.7%和100%.结论本组研究结果表明E-cadherin是一个体腔积液内癌细胞的敏感和特异的标记,可以作为免疫细胞化学鉴别良恶性体腔积液的抗体组合成员之一.

目的探讨进展期胃癌组织中c-erbB-2原癌基因扩增情况及其与胃癌临床病理的关系.方法应用差别PCR技术检测47例进展期胃癌组织中c-erbB-2原癌基因的扩增.结果(1)胃癌中c-erbB-2原癌基因扩增率为34.0%(16/47);(2)胃癌侵及肌层c-erbB-2原癌基因扩增率为13.3%,侵及浆膜层组织c-erbB-2原癌基因扩增率为43.8%,两者有显著差异;(3)胃癌组织中c-erbB-2原癌基因扩增与患者年龄、性别、肿块位置、肿块大小、分化程度、淋巴结转移无显著相关性.结论c-erbB-2原癌基因扩增与胃癌的发生有一定关系,与进展期胃癌的浸润能力密切相关,在胃癌的诊断、治疗、预后判断中具有临床应用价值.

目的探讨nm23和E-cadherin在大肠癌转移进展过程中的作用及相互关系.方法用免疫组化EnVision二步法分别检测186例大肠癌、癌旁组织和20例正常大肠粘膜nm23和E-cadherin蛋白的表达情况,结合临床病理资料进行分析.结果nm23和E-cadherin蛋白在大肠癌组织的阳性表达率分别为52.7%、56.5%,显著低于癌旁组织(分别为90.99%、95.2%)和正常大肠粘膜(分别为95%、100%);nm23和E-cadherin在高分化腺癌的阳性率高于中-低分化腺癌;随着Dukes分期从A期到D期,淋巴结的转移,nm23和E-cadherin的表达显著降低或缺失;nm23和E-cadherin在大肠癌的表达呈正相关.结论nm23和E-cadherin表达的降低或缺失与大肠癌的恶性进展,转移具有密切关系,检测大肠癌组织中的nm23和E-cadherin的表达水平对预测患者的预后具有重要意义.

目的揭示进展期胃癌中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达规律,分析其与胃癌临床病理特征的关系,以探讨HIF-1α蛋白在胃癌血管形成中的作用.方法应用免疫组化方法检测50例胃癌组织HIF-1α、VEGF蛋白及微血管密度(MVD)的表达.结果胃癌组织HIF-1α蛋白与VEGF阳性表达率分别为68%(34/50)和62%(31/50),MVD平均计数为23.14±11.58;HIF-1α表达与淋巴结转移有关(P＜0.05);VEGF、MVD表达与肿瘤浸润深度(P＜0.05)、淋巴结转移(P＜0.05)和PTNM临床分期(P＜0.05)密切相关;HIF-1α与VEGF表达密切相关(x2=4.96,P＜0.05);HI-1α或VEGF表达阳性的MVD值显著高于阴性组(P＜0.05).结论HIF-1α、VEGF是反映胃癌浸润转移等生物学行为的重要指标,HIF-1α诱导VEGF表达从而促进肿瘤血管生成可能参与胃癌的进展.

目的探讨Survivin在乳腺癌发生、发展中的作用及其与Caspase-3蛋白表达和细胞增殖的相互关系.方法用免疫组化S-P法检测Survivin在正常乳腺组织(10例)、乳腺囊性增生组织(18例)、不典型增生组织(20例)和乳腺癌组织(50例)中的表达以及Caspase-3、PCNA在乳腺癌组织中的表达.结果Survivin蛋白在正常乳腺组织无表达,在乳腺囊性增生组织、不典型增生组织、乳腺癌组织中的阳性率分别为5.6%(1/18)、45.0%(9/20)、72.0%(36/50),差异有显著性(P＜0.05).Survivin蛋白的表达与临床分期和淋巴结转移有关(P＜0.05),与年龄、是否绝经、肿瘤大小和组织学分级均无关.Survivin与Caspase-3的表达呈负相关(P＜0.01).Survivin蛋白表达阳性的乳腺癌PCNA的标记指数明显高于Survivin蛋白表达阴性的乳腺癌细胞PCNA的标记指数(P＜0.01).结论Survivin蛋白在乳腺癌中表达上调,提示其通过抑制凋亡在乳腺癌发生、发展中起重要作用,可能成为乳腺癌基因治疗的新靶点.Survivin通过与激活的Caspase-3结合,抑制其活性,从而阻止细胞凋亡.Survivin不仅参与凋亡的调控,还促进了细胞增殖.

目的探讨p16和nm23在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义.方法采用免疫组化SP法观察69例膀胱癌石蜡标本中p16和nm23的表达情况.结果膀胱癌组织中p16和nm23的阳性表达率分别为40.57%和43.48%,阳性表达率随病理分级、临床分期升高而下降,复发肿瘤阳性表达率显著低于未复发病例.结论p16和nm23表达可能成为判断膀胱癌生物学行为的重要指标之一.

目的通过对569例晚期肺癌死亡病例分析,讨论生存期与不同年龄组以及疾病是否转移之间的关系,对宁养院收治病人的范围、病程和年龄提供依据.预测疾病生存率,对癌症病人临终期的研究提供参考.方法对接受过宁养服务自然死亡的全部晚期癌症病例,计算各癌症、各年龄段的中位生存期、平均生存期和预期生存率.结果(1)经宁养院服务的肺癌病人平均中位生存期54.92天,预期生存率(1周预期生存率为47.10%,5周预期生存率为10.19%,10周预期生存率为1.58%);(2)不同年龄段的中位生存期(天):＜30:77.00,30-:42.50,40-:62.00,50-:58.25,60-:54.75,70-:50.00,80-:88.00,提示小于30岁和80岁以上年龄组中位生存期较长;(3)癌症无转移与有转移的病例之间中位生存期经时序检验有显著差异.结论所有检验均采用双侧检验,比较客观反映生存期情况,对各种疾病的临终期提供参考.

目的探讨1992～2004年间哈尔滨市南岗区恶性肿瘤死亡状况及规律,为哈尔滨市恶性肿瘤的防治提供科学依据.方法收集整理1992～2004年间哈尔滨市恶性肿瘤死亡资料,统计死亡率,死亡构成比、截缩病死率、肿瘤死亡发病比等指标.结果哈尔滨市南岗区1992～2004年恶性肿瘤死亡资料的分析我们发现恶性肿瘤的死亡率主要在35岁以后发生,而死亡主要集中在55～70岁年龄段.从截缩死亡率的趋势看男性远高于女性,2002年以后出现大幅上扬,达到46.49%,应引起高度警惕.从死亡发病比看总的趋势是下降.结论应加强中老年人群的恶性肿瘤防治工作,特别是女性.

目的探讨脐血综合利用途径.方法收集脐血基质细胞培养1～5周的上清,观测其对脐血细胞DNA合成代谢的影响.结果ConA诱导的人脐血基质细胞上清对脐血细胞DNA合成随培养时间变化而表现出抑制和刺激作用.结论该上清中至少含有两种以上生长因子.

目的通过比较鼻咽癌放射治疗的不同技术方法,了解各技术方法的优势及不同点,以期找到更有效并切合实际的技术方法,有助于提高鼻咽癌的放疗技术水平.方法常规外照射技术;等中心整体挡铅技术;三维适形放射治疗技术.结果三种技术方法各具优缺点.结论三维适形放射治疗技术最具优势,但设备和技术方面要求较高.常规外照射技术经济实用,技术稳定性较差.等中心整体挡铅技术,技术质量稳定.

目的探讨NP方案的新辅助化疗对局部晚期非小细胞肺癌的疗效和毒副作用.方法针对40例局部晚期非小细胞肺癌患者,术前给予NP方案(盖诺+顺铂)进行化疗;盖诺(国产长春瑞滨)25 mg/m2静脉点滴,第1、8天,顺铂40 mg/m2～50 mg/m2,静脉点滴第1、2、3天给药,21天为一周期,连续两周期;化疗结束后二周施以手术治疗.结果全组病例CR:2例,PR:20例,SD:15例,PD:3例.总有效率:55%(22/40)手术切除率92.5%(37/40),根治切除率72.5%(29/40),术后一年生存率为77.5%(31/40),二年生存率为65%(26/35).结论NP方案对局部晚期的非小细胞肺癌治疗有效,毒副反应小,有望提高生存年限.

目的观察美罗华联合化疗治疗老年人侵袭性B细胞非霍奇金淋巴瘤的临床疗效.方法8例经病理证实CD20性的B细胞非霍奇金氏淋巴瘤患者,年龄60岁～69岁,使用美罗华375 mg/m2,静脉滴注,每周1次,共4周为1疗程,同时使用CEOP方案化疗.结果8例患者经治疗后,完全缓解6例,部份缓解2例,无明显毒副作用.结论美罗华联合化疗治疗老年人CD20阳性B细胞非霍奇金氏淋巴瘤是一种有效的治疗方案,无明显毒副作用.

目的探讨胃肠道间质瘤(GIST)的误诊原因,提高GIST的诊断和鉴别诊断水平.方法回顾性分析5例CT误诊为GIST的病例的胃肠道钡餐造影和CT表现.结果5例中2例行胃肠道X线钡餐检查,病理证实胃肠道腺癌3例,胃类癌1例,肠系膜恶性间皮瘤1例.结论胃肠道间质瘤的影像学表现缺乏特异性,需与多种消化道病变相鉴别,胃或肠腔的偏心性狭窄、局部形成倾向于向外生长的肿块、肿块内出现不规则坏死区、CT增强扫描肿块不均匀明显强化是胃肠道间质瘤的重要影像学表现.

目的探讨CT导引下经皮穿刺活检对肺内孤立性病变的诊断价值.方法对我院2001年以来,肺内病变患者103例进行了CT导引下经皮肺穿刺活检,病灶直径最小1.1 cm,直径最大5.7 cm.其中男性80例,女性23例,取出病变组织或细胞,做出明确的病理或细胞学诊断.结果对103例肺内病变穿刺活检总的诊断成功率为100%,5例少量出血(发生率为5%),10例出现气胸(发生率为10%),其中1例气胸严重需放置引管处理,自行吸收.结论CT导引下经皮穿刺活检是一种简单、安全、可靠的诊断肺内孤立病变的好方法,它以高准确性和低并发症逐渐得到同行们认可,具有很高的临床实用价值.

目的通过胃癌术后存活患者的营养素调查,提供胃癌患者康复时期科学信息.方法选择84例胃癌患者术后仍存活1年以上患者为调查对象,自行编制调查表,内容包括:一般情况及膳食摄入量情况;生存质量设20个问题.统计采用描述分析和线性回归分析.结果本组84例胃癌患者生存质量总分平均值为68.85分,营养素均未达标,硒达标率最低(5.09%),影响生存质量的有统计学意义营养素为热能、蛋白质、钙、铁等8种.结论胃癌患者的原来体质差,免疫力低,提供合理营养素利于提高患者的体质和免疫水平,可提高生存质量.

目的采用RT-PCR技术、基因重组技术及脂质体转染技术等克隆得到hGM-CSF基因并获得高滴度重组腺病毒.最终目的是为GM-CSF造血干细胞肿瘤基因治疗提供基础研究准备.方法应用RT-PCR技术从人脐带血淋巴细胞中克隆出hGM-CSF基因,再应用基因重组技术构建含hGM-CSF基因的重组腺病毒载体,进而通过反复转染293包装细胞得到高滴度重组腺病毒.结果克隆出hGM-CSF基因,经测序证实结果正确;得到高滴度的重组腺病毒,提取病毒DNA证实含目的基因.结论用LoxP/Cre体外重组法成功构建了hGM-CSF的复制缺陷型重组腺病毒.

目的研究蒙药升阳十一味丸对体外培养的人胃癌MGC-803细胞系抑制作用,并探讨其作用机理.方法通过MTT法检测药物作用后细胞的增殖抑制率,倒置光显微镜、透射电镜、Hochest33342/PI荧光染色观察细胞形态学变化,检测凋亡细胞.结果MTT显示,蒙药升阳十一味丸能抑制MGC-803细胞的增殖,其IC50值在2.0 mg/ml左右;光镜、电镜下可见凋亡细胞,凋亡细胞的比率较对照组明显增加.结论蒙药升阳十一味丸对胃癌MGC-803细胞具有明显的抑制作用,这种抑制作用可能是通过诱导细胞凋亡而实现的.

目的HCV检测率高,提示自身免疫性甲状腺炎,可能由抗-HCV诱发.方法用ELISA方法检测共80例结节性甲状腺肿的患者的HCV,同时检测HBsAg(乙肝表面抗原).结果抗-HCV阳性26例,阳性率为32.5%,HBsAg阳性为8例,阳性率为10%,明显低于抗-HCV阳性率.结论抗-HCV阳性与诱发结节性甲状腺肿的发生可能有一定关系.

目的评价福达华、米拓蒽醌、地塞米松(FMD)对比CVP方案治疗复发难治性惰性淋巴瘤的临床疗效及毒性反应.方法27例患者随机分为2组,A组选用FMD方案:Fludara:25mg/m2/d,静脉滴注30分钟,d1-3;MXT:10 mg/m2,静脉滴注30分钟,d1;DXM:20 mg/d,口服,d1-5.B组应用CVP方案:CTX:750 mg/m2,静脉注射,d1;VCR:1.2 mg/m2,静脉注射,d1;PDN:100 mg/d,口服,d1-5.结果A组14例,CR 35.71%,PR 50%,有效率为85.71%;B组13例,CR 30.76%,PR38.46%,有效率69.23%.两组之间有显著统计学差异,(P＜0.05).FMD方案主要毒副反应是骨髓抑制.结论FMD方案与CVP方案比较治疗复发或难治性惰性淋巴瘤临床效果好,总有效率明显提高,且具有较好的耐受性.

目的探讨低分子多糖对肿瘤血管生长因子的抑制作用.方法采用低分子多糖点样于接种肿瘤血管生长因子的鸡胚绒毛尿囊膜上,分别50 ug、100 ug、200 ug及对照组,置37℃CO2培养箱,48 h后观察结果.结果低剂量组50 ug组肿瘤血管生长略受抑制,中剂量100 ug组肿瘤血管生长受到明显抑制,高剂量200 ug组肿瘤血管出现坏死.结论低分子多糖能明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜中的肿瘤血管生长,并随剂量增加对肿瘤血管生长因子的抑制作用而增强,且具有很强的抗血管生成活性.

目的探讨三维适形放疗技术(3DCRT)在局限性前列腺癌的根治性放疗疗效与毒副反应.方法103例经病理证实的前列腺癌病人,T1-3N0M0,其中:T1:19例,T2:70例,T3:16例.平均年龄69.6岁.Gleason病理分级≥7:39例;PSA≥10:69例.所有病人接受直线加速器10 MV X线全程三维适形放疗(3DCRT),总剂量70 Gy～73.8 Gy.结果2年总生存率98.5%,无病生存率83.5%.13例(12.6%)局部复发;2例(1.9%)病人远处转移;2例(1.9%)病人死亡.膀胱和直肠≤Ⅱ级(RTOG)毒副反应分别为30例(29.1%)和28例(27.2%).结论局限性前列腺癌的三维适形放疗可提高前列腺局部剂量,相邻组织器官的毒副反应发生率低.有较高的局部控制率和良好的耐受性.可望成为局限性前列腺标准治疗.

目的评价为可安预防肝动脉化疗栓塞后胃粘膜损伤的效果.方法142例肝癌患者分两组,80例治疗组患者用为可安,剂量为40 mg/d,化入100 ml生理盐水中静脉滴注,62例患者生理盐水常规补液作为对照组.结果对照组中有5个患者出现明显的左上腹或剑突下疼痛,4例经证实为消化道溃疡,存在胃粘膜损伤.而治疗组未出现明显胃区疼痛患者.结论为可安对在肝动脉化疗栓塞后预防胃粘膜损伤有效.

目的探讨Survivin基因在人体非小细胞肺癌组织中的表达及临床意义.方法采用免疫组化的方法研究Survivin基因在人体肺癌中的表达情况,并对结果进行分析.结果Sur-vivin基因在肺癌组织中高表达(78.0%),而在正常组织中低表达(6.0%).Survivin基因在肺癌组织中的高表达有统计学意义(P＞0.05),但是与病理类型,分化程度,分期和淋巴结的转移情况无关.结论Survivin基因在人体肺癌的发展中起重要的作用,但是检测它的表达对预后的分析没有意义.