目的 构建DAB2IP高表达的结直肠癌HT29稳定细胞系,检测其对HT29细胞侵袭及迁移能力的影响。方法 将携带DAB2IP基因序列的pcDNA3.1质粒转染HT29细胞,24h后加入适量浓度的G418筛选(10μg/mL),两周后,通过实时定量PCR(qPCR)和Western blot方法检测DAB2IP mRNA水平和蛋白水平,验证DAB2IP的高表达;进一步,通过Transwell及划痕实验检测DAB2IP对HT29细胞侵袭及迁移能力的影响;最后,通过Western blot方法检测其对E-cadherin和vimentin蛋白的表达,初步探讨DAB2IP影响HT29细胞侵袭迁移能力的机制。结果 经G418筛选后,DAB2IP的mRNA和蛋白水平均较对照组明显升高;高表达DAB2IP能够明显抑制HT29细胞的侵袭及迁移能力,差异具有统计学意义(P＜0.001);高表达DAB2IP能够促进HT29细胞E-cadherin蛋白的表达,抑制vimentin蛋白的表达。结论 成功筛选出DAB2IP高表达的HT29稳定细胞系,高表达DAB2IP能够通过抑制细胞上皮间质转化过程从而抑制HT29细胞侵袭及迁移能力。

目的 研究FOXD3对肺癌细胞系A549增殖和迁移的影响。方法 在TCGA数据库中对FOXD3在多种肿瘤中的表达情况进行分析。使用在线数据库GEPIA评估FOXD3 mRNA表达对患者预后影响。构建FOXD3过表达肺癌细胞系并进行功能学实验检测FOXD3在肺癌中的作用。使用STRING数据库对FOXD3参与的调控网络进行预测。结果 通过比对肿瘤的表达谱显示,FOXD3在肿瘤中具有差异性表达,其中FOXD3在皮肤黑色素瘤(SKCM)中表达上调,FOXD3在肿瘤中表达下调的有:结肠腺癌(COAD)、直肠腺癌(READ)、睾丸生殖细胞瘤(TGCT)。使用GEPIA数据库对肿瘤患者生存进行研究发现FOXD3与肺鳞癌(LUSC)、皮肤黑色素瘤(SKCM)、 肾上腺皮质瘤(ACC)以及低分化胶质瘤(LGG)肿瘤患者总生存期有关。FOXD3能够抑制肺癌细胞增殖和迁移侵袭能力;通过使用STRING数据库发现FOXD3能够参与多种基因的表达调控。结论 FOXD3过表达抑制肺癌细胞增殖和迁移侵袭能力并与患者预后密切相关,因此FOXD3能够作为指示肺癌良好预后的标志,并且为肿瘤治疗提供新思路。

目的 研究妊娠上调的非泛素性钙调蛋白激酶(Pregnancy-upregulated nonubiquitous calmodulin kinase,PNCK)在鼻咽癌组织中的表达以及对鼻咽癌细胞增殖和凋亡的作用。方法 采用免疫组织化学方法检测鼻咽癌癌组织和正常组织中PNCK表达水平。构建慢病毒载体干扰PNCK基因表达,并采用Real time PCR和免疫印迹结果证实,采用MTT方法、流式细胞术、Caspase3和Caspase7活性检测鼻咽癌肿瘤细胞增殖和凋亡的变化。结果 免疫组织化学结果显示PNCK蛋白在鼻咽癌癌组织中呈特异性高表达。Real time PCR和免疫印迹结果证实慢病毒成功干扰鼻咽癌CNE-2Z细胞中PNCK表达(PNCK基因在mRNA和蛋白水平表达受到显著抑制)。MTT检测结果显示抑制PNCK表达抑制CNE-2Z细胞增殖。此外,干扰PNCK表达引起CNE-2Z细胞Caspase3和Caspase7活性上升,流式细胞术表明干扰PNCK基因表达可以促进CNE-2Z细胞凋亡。结论 干扰PNCK基因表达抑制鼻咽癌细胞增殖并诱导肿瘤细胞凋亡,可能是治疗鼻咽癌的潜在靶点。

目的 探讨体外棕榈酸(Palmitic acid,PA)抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移、侵袭和诱导凋亡作用及其部分机制。方法 体外培养的宫颈癌HeLa细胞分为对照组(不加药)、PA处理组(分别加入PA 25、50、100μg/mL处理),CCK-8法检测各组HeLa细胞增殖情况,Transwell试验检测细胞的迁移和侵袭能力,qRT-PCR检测不同浓度PA处理后细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax及Cleaved-caspase-3的表达,PA处理后的HaLa细胞用膜联蛋白V/碘化丙啶双标,随后用流式细胞仪检测其凋亡情况。结果 与对照组比较,PA处理HeLa细胞后增殖抑制率逐渐增高(P＜0.05);PA处理后,HaLa细胞的迁移与侵袭能力显著下降(P＜0.05);同时,PA处理HeLa细胞后,随着PA浓度增高,Bcl-2基因表达逐渐降低,而Bax和Cleaved-caspase-3基因表达逐渐增强与流式细胞仪检测结果相符合,HeLa细胞的凋亡率随着PA浓度增高逐渐增高(P＜0.05)。结论 PA体外可抑制HeLa细胞增殖,减少其迁移与侵袭水平,并诱导其凋亡,其机制可能与调节HeLa细胞Bcl-2家族有关。

目的 探索紫云英苷(ATG)抑制卵巢癌细胞HIF-1α表达及细胞增殖和侵袭的作用及机制。方法 分别给予缺氧条件培养的OVCAR-8和SK-OV-3细胞ATG(ATG组)或ATG联合PHD2抑制剂IOX2(ATG+IOX2组)处理24h,并以仅缺氧培养24h的细胞为空白对照。采用Western blot和实时荧光定量PCR检测各组细胞HIF-1α、PHD2、PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白和mRNA表达变化;以正常条件培养的细胞为阴性对照,采用缺氧试剂盒检测ATG处理后细胞缺氧状态变化;采用Transwell实验检测各组细胞侵袭能力;采用CCK-8试剂盒检测各组细胞增殖活力。分别以梯度浓度的ATG联合梯度浓度的卡铂或顺铂处理OVCAR-8和SK-OV-3细胞72h后采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖活力,并进行联合效应分析。结果 缺氧培养条件下,与空白对照组相比,ATG组OVCAR-8和SK-OV-3细胞PHD2蛋白及mRNA表达均升高,细胞增殖和侵袭能力均降低,HIF-1α蛋白表达均减少,PCNA、MMP-2和MMP-9蛋白及mRNA表达均降低,但HIF-1α的mRNA水平以及细胞缺氧状态无明显变化;而与ATG组相比,ATG+IOX2组OVCAR-8和SK-OV-3细胞增殖和侵袭能力均增加,PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白和mRNA表达及HIF-1α蛋白表达均升高,但HIF-1α的mRNA水平无明显变化。此外,ATG可明显增强OVCAR-8和SK-OV-3细胞对顺铂和卡铂的敏感性,具有较好的联合效应。结论 ATG可通过上调PHD2表达,促进缺氧诱导的HIF-1α降解,进而抑制卵巢癌细胞增殖和侵袭。

目的 探究PTPN9在结直肠癌中的表达情况及其与各项临床指标关系。方法 回顾性分析2007年12月—2008年12月于哈医大附属肿瘤医院就诊且病理明确、临床资料完整的结直肠癌患者,共146例。随机挑选出132例患者的肿瘤组织和14例患者的非癌组织,进行PTPN9蛋白质免疫组化染色,由两位高年资的病理科医师进行双盲评分。参照染色评分,比较患者的年龄、性别、大体形态、分化程度、预后等各项临床指标。生存分析采用Kaplan-Meier曲线,应用Cox比例风险模型进行多因素分析。结果 PTPN9在肿瘤组织中呈高表达水平(P=0.009),且与N分期(P=0.021)、M分期(P=0.022)、病理分期(P=0.008)、糖尿病患病(P=0.022)和生存情况(P=0.001)有关。与低表达PTPN9的结直肠癌患者相比,高表达PTPN9的结直肠癌患者总生存期下降(P＜0.001)。多因素Cox回归分析显示,PTPN9的表达水平为影响结直肠癌患者预后的独立风险因素之一(HR=1.202,P＜0.05)。结论 PTPN9的表达强度在癌组织与非癌组织中有统计学差异,在癌组织中的表达强度更高;随着PTPN9的表达强度增高,肿瘤病理分期也随之升高;高表达的PTPN9与糖尿病发病之间存在一定相关性;高表达PTPN9的结直肠癌患者的总生存期较短。

目的 探讨外周血中去泛素化酶USP1甲基化及临床特征与大肠癌预后风险的关系。方法 采用队列研究,共纳入286例大肠癌患者。使用高分辨率熔解曲线分析法(HRM)检测基因甲基化水平。应用Cox回归模型评估基因甲基化及临床特征与大肠癌预后风险之间的关联。结果 在男性大肠癌病例中,USP1甲基化增加预后不良风险(HR=2.091,95% CI:1.195~3.661,P=0.010)。临床病理特征中,UICC肿瘤分期4期(HR=2.464,95% CI:1.205~5.039,P=0.014)、肿瘤大小超过50mm(HR=1.610,95% CI:1.016~2.550,P=0.043)和组织学非腺型(HR=5.117,95% CI:1.142~22.930,P=0.033)是大肠癌不良预后风险增加的影响因素。结论 UICC肿瘤分期4期、肿瘤大小超过50mm和组织学分型为非腺型会增加大肠癌不良预后风险。外周血USP1基因启动子区甲基化与男性大肠癌预后不良风险增加有关。

目的 探讨D-二聚体水平与肿瘤患者导管相关性血栓(Catheter related thrombosis,CRT)发生的相关性。方法 对100例住院的深静脉置管肿瘤患者进行前瞻性研究,动态监测血浆D-二聚体以及静脉多普勒超声检查,观察CRT的发生率、发生时间及血栓类型等。结果 CRT的发生率为12.6%,其中无症状血栓占83.3%。58.3%的血栓发生在置管后2周内,91.7%发生在置管后的置管后4周内。置管后2周血栓组D-二聚体水平显著高于非血栓组(P=0.013)。结论 肿瘤患者CRT大部分形成于深静脉置管后4周内,其中无症状性血栓的比例高,动态监测D-二聚体可能有助于其早期诊断。

目的 探讨放疗延迟对乳腺癌不同分子亚型患者预后的影响。方法 收集2007年1月—2012年12月在我院行乳腺癌根治术患者341例,其中Luminal A型149例(对照组83例,放疗延迟组66例),Luminal B型105例(对照组63例,放疗延迟组42例),HER2+型43例(对照组28例,放疗延迟组15例),三阴型患者44例(对照组27例,放疗延迟组17例)分析放疗延迟组与对照组预后是否存在差异。结果 Luminal A型、Luminal B型、HER2+型、三阴性型在对照组和放疗延迟组的局部复发率分别为(4.8% vs. 9.1%,P=0.301),(4.7% vs. 19.0%,P=0.019),(7.1% vs. 33.3%,P=0.027),(11.1% vs. 35.3%,P=0.053);远处转移率分别为(9.6% vs. 10.6%,P=0.845),(11.1% vs. 14.2%.P=0.234),(32.1% vs. 40.0%,P=0.937),(37.0% vs. 41.2%,P=0.784);无瘤生存率分别为(85.5% vs. 80.3%,P=0.395),(84.1% vs. 66.7%,P=0.037),(60.7% vs. 33.3%,P=0.087),(55.5% vs. 23.5%,P=0.037);总生存率分别为(94.0% vs. 90.9%,P=0.539),(84.1% vs. 80.9%,P=0.672),(67.9% vs. 60.0%,P=0.606),(59.2% vs. 41.2%,P=0.242)。Cox回归分析结果显示肿瘤大小(HR=3.156,P=0.043)、淋巴结转移(HR=1.074,P=0.001)、TNM(HR=8.591,P=0.009)和分子亚型(HR=2.092,P＜0.001)为乳腺癌患者预后的独立影响因素。结论 Luminal B型及HER2+型患者的局部复发率均因放疗延迟而明显增高,Luminal B型及三阴型的无瘤生存率因放疗延迟而明显降低。肿瘤大小、淋巴结转移、TNM分期和分子亚型是影响患者总生存期的独立危险因素。

目的 本文旨在探讨胃癌骨转移患者的临床病理特征,筛选预后因子。方法 回顾性分析2007年4月—2013年12月哈尔滨医科大学附属肿瘤医院的157例胃癌骨转移患者临床资料。结果 157例胃癌骨转移患者中,确诊胃癌至骨转移的中位时间为280.5天。多发骨转移124例,单发骨转移22例。最常见的骨转移部位是脊柱(88.5%)、骨盆(51.6%)和肋骨(51.0%)。多数患者伴有骨外脏器转移(78.3%)。骨转移的胃癌患者病理分化大多较差,以低分化腺癌(69.3%)及印戒细胞癌及粘液腺癌(33.1%)多见。胃癌患者发生骨转移后的中位生存时间为109天。单因素分析显示CEA水平、LDH水平、血红蛋白浓度、白蛋白浓度、伴有骨外转移、化疗及双膦酸盐治疗与胃癌骨转移患者预后有关(P＜0.05)。多因素分析显示CEA水平、伴有骨外转移、化疗和双膦酸盐治疗均是胃癌骨转移预后的独立因素。结论 CEA升高及伴有骨外转移是其独立的不良预后因素,化疗和双膦酸盐药物治疗可能改善患者的预后。

目的 探究血清铁蛋白在头颈癌患者体内的表达,并验证其是否可作为预测头颈癌转移的生物标志物。方法 比较肿瘤患者、癌前病变患者、炎症患者和正常对照之间血清铁蛋白水平的差异,并用ROC曲线验证铁蛋白和多普勒超声在有淋巴结转移和无淋巴结转移的头颈癌患者之间的区分效能。结果 肿瘤患者的血清铁蛋白水平显著高于非肿瘤患者,但与癌前病变相比具有一定的重叠。与无转移的头颈癌相比,有淋巴结转移的头颈癌患者的血清铁蛋白水平显著升高。与多普勒超声相比,铁蛋白对于颈部淋巴结转移的预测具有更大的曲线下面积和更高的敏感性和似然比。结论 铁蛋白对于头颈癌的早期诊断可能存在一定的不足,但对于预测头颈癌患者颈部淋巴结转移是一种良好的生物标志物。

目的 探讨高频超声下转移性淋巴结及其他常见颈部淋巴结疾病在颈淋巴结解剖分区中的分布规律。方法 回顾性分析2016年9月—2017年9月共547例颈部肿大淋巴结资料,根据病理结果分为非特异性淋巴结炎、淋巴结结核、淋巴瘤、转移性淋巴结四类,记录淋巴结常规超声参数及其在颈部淋巴结解剖分区中的分布。结果 不同颈部淋巴结疾病在颈部淋巴结解剖分区中的分布状态不同。头颈部肿瘤的颈部淋巴结转移多分布于Ⅱ(62.00%)、Ⅲ(54.00%)及Ⅳ区(53.00%),锁骨下原发肿瘤的颈部淋巴结转移主要分布于Ⅴ(72.56%)、Ⅳ区(34.15%)。对特定肿瘤而言,还存在淋巴结转移的高危区域。结论 超声检查可显示淋巴结疾病在颈部解剖分区中的分布情况。术前明确淋巴结疾病在解剖分区中的分布规律,可为临床的诊疗、手术术式及清扫范围提供更精确的依据。

急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)是来源于胸腺T细胞祖细胞的具有强侵袭性和异质性的血液系统恶性肿瘤。T-ALL约占儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的15%,在成人ALL中的比例约为25%。强化化疗方案的应用使儿童T-ALL患者预后显著提高,但成人及复发耐药T-ALL患者的预后仍较差。研制新型靶向药物特异性阻断T-ALL细胞内生存及耐药相关的异常激活信号通路近年来被认为是治疗成人及复发难治T-ALL患者的新策略。PI3K/AKT/mTOR通路是T-ALL细胞内异常激活信号通路中具有代表性的一条。目前靶向该通路的多种小分子抑制剂已被成功研制,并在治疗T-ALL的研究中取得良好效果。PI3K/AKT/mTOR通路相关抑制剂较传统化疗药物具有更高的特异性和更低的毒副作用,且诸多研究表明其与低剂量化疗药物或其他靶向药物联合治疗T-ALL能发挥协同效应。本综述将总结近年来在PI3K/AKT/mTOR通路与T-ALL相关领域的研究成果,并对基于靶向该通路治疗T-ALL的研究进展一并阐述。

RNA结合蛋白Lin28在多种恶性肿瘤组织中表达。某些转录因子和RNA结合蛋白可以在转录水平和转录后水平上调Lin28的表达。而高水平的Lin28可以通过影响miRNA的表达或调控靶mRNA的转录、剪接、稳定性和翻译等过程来诱导正常细胞恶性转化,并可对肿瘤细胞的增殖和转移等过程产生促进作用。Lin28高表达具有诱导肿瘤发生和进展的重要作用,同时也是评估恶性肿瘤预后状态的重要生物学标志。本综述总结现有文献内容,对Lin28在恶性肿瘤中的作用、上调的分子机制和发挥作用时的下游调控机制进行了概括,对充分认识Lin28分子具有重要意义。

血管生成是肿瘤发生发展的关键条件之一,抗血管生成药物可阻断血管生成,被认为是治疗各种癌症,特别是晚期癌症的一个重要的突破。抗血管生成药物在晚期胃癌、结直肠癌、前列腺癌及肝癌患者联合化疗中显示出较好的疗效。然而,在乳腺癌中,研究却显示了矛盾的结果,引起了关于这种药物价值的争论。本文回顾了乳腺癌抗血管生成治疗选择的证据,并讨论了限制抗血管生成药物有效性的可能因素,并提出了关于乳腺癌未来治疗方法研究的建议。

类固醇激素尤其雌激素和孕激素在乳腺癌的发病、进展和治疗中起着重要作用。与此同时,大量的研究证实肿瘤干细胞在乳腺癌发生、进展和转移过程中也起着关键作用。在乳腺癌临床治疗中,尽管肿瘤细胞经过常规抗内分泌治疗后受到了明显的抑制,但仅需少量的乳腺肿瘤干细胞(Breast cancer stem cells,BCSCs)存在,仍可维持肿瘤的再生长。以往大量的研究多集中在激素对正常乳腺发育及其与乳腺癌的相关性方面,最近,更多的研究观察激素对乳腺肿瘤干细胞活性影响,这为乳腺癌治疗和肿瘤干细胞研究开辟了新的方向。本文全面讨论类固醇激素(雌激素和孕激素)在乳腺癌中的作用及其对乳腺肿瘤干细胞的活性调节。

lncRNA在癌症患者的肿瘤组织和体液中易于检测,当lncRNA作为生物标志物时可以辅助诊断和治疗多种癌症。通过实时荧光定量PCR等分子工具对lncRNA进行检测可以诊断癌症,lncRNA中的SNP也可以为患者的癌症风险进行预测,有些lncRNA已被作为治疗靶点来治疗癌症。因此lncRNA对癌症患者的诊断、治疗及预后都有重要作用。

CDK-RB-E2F通路和PI3K-AKT-mTOR通路对乳腺癌耐药机制起到了关键作用。通过对两个通路的研究发现,在治疗激素受体阳性的乳腺癌时,CDK4/6抑制剂与内分泌药物联合使用可以提高患者的生存率,mTOR抑制剂也显示出抗肿瘤的实力。最近的研究表明,mTOR抑制剂和CDK4/6抑制剂联合使用可以进一步抑制CDK-RB-E2F通路激活,协同控制肿瘤细胞增殖。同时发现CDK4/6抑制剂耐药患者的CDK-RB-E2F通路重新激活,仍对mTOR抑制剂敏感。还有研究表明CDK4/6抑制剂和mTOR抑制剂可以通过自噬作用协同控制肿瘤的发生。本文针对两药联合在乳腺癌中的作用机制进行综述。