目的 应用shRNA文库筛选肺上皮细胞相关肿瘤抑制基因,并验证其抑制细胞恶性转化的功能,为肿瘤防治提供新的靶点。方法 用GP2-293病毒包装细胞系建立shRNA逆转录病毒文库,感染永生化肺上皮细胞BEAS-2B,经软琼脂克隆形成实验筛选转染的上皮细胞克隆,选择转化细胞克隆经PCR扩增出所插入的shRNA片段,经Sanger法测序和比对确定相应shRNA的靶点基因。通过软琼脂克隆及裸鼠成瘤实验验证候选肿瘤抑制基因INPP4B的肿瘤抑制功能。MTT实验检测细胞的增殖情况。结果 通过软琼脂克隆形成筛选出6个候选基因,选取INPP4B进行功能验证。在BEAS-2B细胞中沉默INPP4B基因可促进细胞的克隆形成,细胞增殖速度加快,沉默细胞系在裸鼠皮下成瘤能力增强,说明INPP4B参与肿瘤形成。结论 shRNA文库及软琼脂克隆形成实验是筛选肿瘤抑制基因的一个有力工具,INPP4B是肺上皮细胞恶性转化抑制因子。

目的 本研究旨在探讨TSP-1基因对人骨肉瘤血管生成的影响及其作用机制。方法 通过构建pBPLV-shRNA-TSP-1干扰载体和pBPLV-TSP-1表达载体,对MG-63细胞进行转染,利用CCK8检测细胞活力,并测定其侵袭能力,然后通过免疫荧光检测细胞内CD36等表达量,qRT-PCR和Western blot检测细胞内TSP-1、CD36、p38MAPK、VEGF、VEGFR-1、EGF和PDGF等基因和蛋白的表达情况。结果 CCK-8及细胞侵袭实验结果显示转染TSP-1过表达载体后细胞活力和侵袭能力相较于空载体组均有显著增强(P＜0.05),而转染TSP-1干扰载体后细胞活力和侵袭能力均有明显降低(P＜0.05);免疫荧光、qPCR、Western blot结果显示过表达TSP-1后TSP-1、EGF、P38、PDGF、VEGF、VEGFR-1的mRNA水平及蛋白表达均有明显升高(P＜0.05),而转染TSP-1干扰载体后相关基因和蛋白的表达均有显著降低(P＜0.05)。结论 TSP-1基因能够促进MG-63细胞的增殖和侵袭能力,促进人骨肉瘤血管形成,其机制与生长因子EGF、VEGF、PDGF表达升高及P38-MAPK通路激活有关。

目的 探究乳腺癌患者CYP2D6基因多态性与他莫昔芬药物代谢产物浓度之间的关系。方法 收集2010年1月—2012年12月我院乳腺癌患者的外周血样本,检测CYP2D6基因上rs16947,rs1065852和rs28371725三种单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphism,SNP)位点的基因型及他莫昔芬代谢产物在血液中的浓度。应用非参数检验中的独立样本Kruskal-Wallis检验进行统计学分析。结果 CYP2D6基因上rs16947位点不同基因型携带者间他莫昔芬代谢产物4-OH-N-D-TAM和4'OH-N-D-TAM在血液中的浓度具有统计学差异(P=0.049),表明CYP2D6基因上的rs16947位点影响他莫昔芬药物在人体内的代谢。结论 乳腺癌患者CYP2D6基因rs16947位点的基因型与部分他莫昔芬代谢产物的血液浓度有关。

目的 研究miR-455-5p在上皮性卵巢癌中的表达情况,分析其表达对上皮性卵巢癌发生发展的影响。方法 从GEO数据库中下载正常卵巢上皮组织与上皮性卵巢癌组织miRNA表达数据GSE83693,通过差异表达分析获得上皮性卵巢癌中miRNA差异表达数据,分析miR-455-5p在正常卵巢上皮与上皮性卵巢癌组织中的表达是否存在差异,应用qRT-PCR验证差异表达预测结果;应用生物信息学软件对miR-455-5p靶基因进行KEGG通路富集分析及GO基因功能注释,探究miR-455-5p表达失调在上皮性卵巢癌发生发展过程中的作用。结果 筛选出明显差异表达miRNA 101例,34例表达上调,67例表达下调;其中miR-455-5p呈明显下调(P＜0.01),差异倍数为-2.9019;qRT-PCR验证结果显示,上皮性卵巢癌细胞(SKOV-3,OVCAR-3,A2780)中miR-455-5p表达量明显低于正常卵巢上皮细胞(IOSE-80),差异均有统计学意义(P＜0.05);KEGG通路富集分析结果显示,miR-455-5p调控的靶基因主要参与的通路共5个,包括有TGF-β信号通路,Hippo信号通路,ECM-受体相互作用,癌症中的转录失调通路,慢性粒细胞白血病,这些通路均与肿瘤相关。GO功能注释分析结果显示上述通路中miR-455-5p调控的靶基因主要参与蛋白质磷酸化,促进细胞增殖、迁移,抑制细胞凋亡,促进上皮-间充质转化,转录调节及调控细胞周期等与肿瘤发生相关的功能。结论 miR-455-5p在上皮性卵巢癌中表达下调,miR-455-5p靶基因参与上皮性卵巢癌肿瘤相关通路与功能,与上皮性卵巢癌发生发展相关。

目的 研究细胞周期检测点激酶1(Checkpoint kinase 1,Chk1)在胶质母细胞瘤细胞(Glioblastoma,GBM)中的表达及其与GBM细胞增殖、成瘤活性和预后生存的关联性。方法 利用TCGA数据库和脑肿瘤分子数据库(Rembrandt)选择和分析GBM中Chk1的表达,并采用Western blot和Real-time PCR等分子生物学技术检测GBM细胞中Chk1的表达水平;通过慢病毒转染siRNA沉默Chk1的表达以探究其对于GBM细胞增殖和成球能力的影响;同时利用免疫组化染色及Rembrandt数据库对Chk1与GBM患者的预后生存关系进行分析。结果 TCGA和Rembrandt数据库分析结果表明Chk1在GBM组织中呈现高表达,同样Western blot和Real-time PCR检测结果显示Chk1在GBM细胞中呈现高表达;慢病毒转染siRNA特异性沉默Chk1能够显著抑制U87细胞的生长(P＜0.01)和成球能力(P＜0.05);预后生存分析结果显示Chk1低表达GBM患者的临床预后显著优于高表达患者(P＜0.001)。结论 Chk1在GBM细胞中过量表达,表达上调能够促进GBM细胞的生长和增殖,并和GBM患者的不良预后相关。

目的 分析泛素结合酶E2T(Ubiquitin-conjugating enzyme E2T,UBE2T)在原发性肝癌中的表达及其与肝癌患者临床病理学参数和预后的关系。方法 从癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库下载正常肝组织和肝癌组织中UBE2T基因mRNA二代测序数据及临床病理资料,分析UBE2T在癌组织和正常组织中的表达差异,阐明UBE2T mRNA表达水平与肝癌患者临床病理学参数的相关关系。采用Kaplan-Meier进行预后分析,利用Cox比列风险回归模型研究与肝癌患者预后相关的因素,并根据基因集富集分析(Gene set enrichment analysis,GSEA)结果预测UBE2T参与肝癌发生、发展的可能调控通路。结果 UBE2T mRNA在肝癌组织中表达明显高于癌旁组织(P＜0.01);UBE2T高表达与Grade分级、TNM分期、有无血管侵袭等密切相关(P＜0.01),且提示肝癌患者的预后不良;TNM分期、血管侵袭、UBE2T表达水平均是影响肝癌患者预后的独立危险因素。结论 UBE2T的高表达与肝癌患者的临床病理因素及预后显著相关,可以作为潜在的判断肝癌患者预后的标志物和肿瘤治疗的靶标。

目的 在已知有效措施的基础上构建一套实用可行的宫颈癌化疗CVT综合防治方案,为临床治疗提供科学指导与依据。方法 2016年11月—2018年1月对164例研究对象进行化疗前CVT发生风险及化疗后CVT评估,构建干预前后CVT发生率改变情况的ITS模型;同时比较ITS模型中干预后患者化疗前后CVT生物标志物和临床检查结果,评价干预措施的效果。结果 干预前后CVT发生率改变情况的ITS模型无统计学意义(P＞0.05);超声心动图检查结果中二尖瓣E峰流速和E/A比值增大,差异均有统计学意义(P＜0.05),LVEF、FS、SV、二尖瓣A峰流速均无统计学差异(P＞0.05);心电图和双下肢动静脉超声检查结果均无统计学差异(P＞0.05);生物标志物检测结果中sICAM-1、sTM、vWF、h-FABP水平出现下降,NO、eNOS水平出现上升,差异均有统计学意义(P＜0.05);hs-CRP、E-selectin水平变化均无统计学差异(P＞0.05)。结论 本研究构建的综合防治方案可在微观上改善宫颈癌化疗CVT,应扩大样本量开展进一步研究。

目的 探讨乳腺炎、良性增生、乳腺癌的全数字化乳腺X线摄影(Full-field digital mammography,FFDM)鉴别诊断。方法 回顾性分析经手术、病理证实的非哺乳期乳腺炎59例、良性增生68例、非肿块型乳腺癌240例,斑片影的观察指标包括其形态、密度、边缘,索条影的观察指标包括索条方向、走行、粗细,通过FFDM征象与病理类型对比进行分组及统计学处理。结果 乳腺炎、良性增生、乳腺癌三组之间索条走行、伴钙化、斑片影形态、索条方向、病变分布、斑片影边缘尖角征存在统计学差异(P＜0.05)。χ²分割显示三组之间斑片影形态、索条方向均具有统计学差异(P＜0.0125)。结论 僵直走行、放射状分布的索条影,形态僵直、段样分布的斑片影,多形性钙化及尖角征对于乳腺癌与其它良性病变的鉴别诊断具有一定价值。

目的 探讨肺癌完全性切除术对肺癌患者外周血中Th17/Treg细胞平衡的影响。方法 流式细胞术检测21例肺癌患者术前、术后和21名健康对照者外周血中Th17、Treg细胞的百分比,RT-PCR法检测PBMC中转录因子孤独核受体(Retinoic acid-related orphan receptor γt,RORγt)、叉头翼状旋转转录因子(Fork-head/winged helix transcription,Foxp3)的表达。ELISA法检测血浆中IL-17和TGF-β1的水平。结果 手术后患者相比术前外周血中Th17细胞百分比减少,而Treg细胞百分比增加(P＜0.01),手术后患者相比术前CD4+T细胞中RORγt表达量降低,而Foxp3表达量升高(P＜0.01),手术后患者相比于术前血浆中IL-17的表达降低(P＜0.01),而TGF-β1的表达增加(P＜0.01)。此外,术前的肺癌患者和健康对照者相比,外周血中Th17和Treg细胞百分比、RORγt和Foxp3表达量以及IL-17和TGF-β表达水平均增加。结论 肺癌完全性切除术后肺癌患者外周血中存在Th17/Treg失衡。

目的 调查和了解乳腺癌化疗患者的生存质量及其影响因素。方法 以欧洲研究和治疗协会的QLQ-C30和QLQ-BR23组成EORTC-BR53量表为主要依据设计调查问卷,对乳腺癌化疗患者的生存质量进行调查,应用秩和检验评价乳腺癌化疗患者的生存质量,应用等级Logistic回归分析影响预后生存质量的因素。结果 诊断与调查时间间隔小于35个月,36~59个月和大于60个月三组中QLQ-BR23量表的性乐趣得分中位数分别为0,0和66.67(P＜0.05),症状量表脱发引起烦恼得分中位数分别为33.33,33.33和10.33(P＜0.05)。改良根治术、区段加前哨和保乳患者的QLQ-C30量表躯体功能得分中位数分别为66.67,66.67和73.33(P＜0.05);改良根治术的恶心呕吐得分为16.67,其他组为0分(P＜0.05);QLQ-BR23三组体形得分中位数分别为91.67,100和100(P＜0.05);性功能得分分别为0,16.67和50(P＜0.05);性乐趣得分中位数分别为0,33.33和66.67(P＜0.05)。对生存质量总症状进行分析,因病借钱和病理分类是化疗的乳腺癌患者生存质量总症状的影响因素(P＜0.05)。结论 化疗的乳腺癌患者生存质量主要与患者的病理分期、是否有经济压力密切相关。

目的 探讨低位结扎肠系膜下动脉(IMA)在非Ⅰ型乙状结肠系膜(SMC)腹腔镜Dixon术中的应用价值。方法 将2017年9月—2018年7月我院胃肠外科收治的71例非Ⅰ型乙状结肠系膜直肠癌患者随机分为两组,即保留左结肠动脉组(低位结扎组)和不保留左结肠动脉组(高位结扎组)。所有患者均行肠系膜下动脉三维重建显影,以指导术中血管精准结扎。比较两组患者一般临床资料、术中及术后量化统计指标。结果 术中3例保留左结肠动脉患者因无法满足吻合被迫转为高位结扎。两组手术时间[170(160,180)vs. 180(170,210)]差异有统计学意义(P=0.026),但两组间性别、年龄、BMI、肿瘤距肛缘距离、TNM分期、术中出血量、脾曲游离率预防造口率、标本长度、瘤体最大径、组织类型、淋巴结清扫总数、D3组淋巴结清扫数目、首次通气时间、术后留院时间及吻合口漏发生率的比较,差异均无统计学意义(P＞0.05)。结论 低位结扎能缩短手术时间并显著减少非计划切除的肠管长度及降低术后吻合口漏发生的风险,有利于患者术后的恢复,具有重要的临床指导价值。

目的 探讨IHP标准视觉判断法、Deauville 5分法和最大标准摄取值下降率(△SUVmax)法三种图像分析方法对恶性淋巴瘤患者的治疗早-中期敏感性判定和预后评估的价值。方法 选取符合入选标准的恶性淋巴瘤患者51例。分别采用IHP标准视觉判断法、Deauville 5分法对患者PET/CT图像进行分析。计算患者治疗前、治疗早中期△SUVmax,通过ROC曲线取得PET/CT对治疗早-中期敏感性判定和预后评估△SUVmax最佳临界值。对比这三种方法诊断效能之间的差异,并采用Kaplan-Meier生存分析、单因素和多因素Cox比例风险回归模型分析恶性淋巴瘤患者DFS的影响因素。结果 ROC曲线分析结果显示△SUVmax为56.95%时PET/CT诊断效能最佳。IHP标准视觉判断法、Deauville 5分法与△SUVmax法对淋巴瘤治疗早-中期疗效评估均可获得较高的灵敏度和阴性预测值,其中△SUVmax法的阳性预测值和准确度均高于另外两种方法。结论 IHP标准视觉判断法、Deauville 5分法和△SUVmax在淋巴瘤治疗早-中期的疗效评估和预测预后方面均有较高的临床价值,均可作为判断预后的独立危险因素。

恶性黑色素瘤(Malignant melanoma,MM)是一种恶性程度极高的实体肿瘤,它极具侵袭性,预后差。尽管晚期黑色素瘤的治疗已经进入靶向和免疫治疗的时代,但是化疗仍然不可摒弃。恶性黑色素瘤的化疗经历了从单药化疗、两药或三药甚至四药的联合化疗、再到生物化疗这一发展过程。本文综述恶性黑色素瘤化疗研究进展,对主要的化疗方案进行比较,展望化疗未来发展的方向。

结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率分别位于第三位和第四位。大约60%的患者确诊时已处于晚期,其5年生存率在13%左右。近20年来,由于转移性结直肠癌(mCRC)晚期一线化疗方案及靶向药物的规范化应用,mCRC的治疗获得了重大突破。奥沙利铂、卡培他滨、贝伐珠单抗、西妥昔单抗等药物的应用使患者的中位生存期提高了一倍,5年生存率提高了20%。mCRC晚期一线治疗的常规模式是持续用药,直至病情进展或出现不可耐受的毒性。但是由于化疗药物的毒性累积,只有三分之一的患者能够坚持接受治疗直至病情进展。而患者在完成既定的初始化疗周期数,达到CR/PR/SD后,继续采用低剂量、低毒性的药物进行维持治疗,既可以延缓肿瘤的进展和转移,又可以减轻药物的毒副作用。目前,维持治疗已经成为mCRC晚期一线化疗后的主要治疗模式。但是,mCRC的最佳维持治疗方案仍无定论,现有的维持治疗方案仍不能找到最佳疗效与最大生活质量之间的平衡点。本文将回顾mCRC现有的维持治疗方案的临床研究,总结mCRC维持治疗现状,并对个体化的治疗策略进行讨论。

结直肠癌是我国目前常见的恶性肿瘤之一,对健康造成了严重威胁,其发病率和死亡率呈逐年上升的趋势。临床应用的早期诊断标志物和疾病活动进展指标存在缺陷。脂质组学通过比较体内脂质代谢物变化特征差异,帮助分析结直肠癌病因、病变进展及辅助临床诊断,为结直肠癌研究提供新方法和平台,本综述对脂质组学在结直肠癌研究中的应用进行论述。

弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是一组高度异质性疾病,具有独特的病理特征和遗传学改变,患者的预后很大程度上取决于此。随着精准医疗的发展,如何更早期的识别出高危患者并予以相关治疗以延长患者的生存时间及提高患者的生存质量尤为重要。近年来,DLBCL预后相关实验室标志物的研究不断取得进展,更有效的预测患者的预后并指导临床治疗。本文将对实验室标志物在DLBCL预后方面的最新研究进展进行综述。